Комментарии к постоянной странице сайта: Очистка олигонуклеотидов из полиакриламидного геля
Элюция олигонуклеотидов из геля, переосаждение.
 
| |
[ Вход | Регистрация ]
|
Очистка олигонуклеотидов из полиакриламидного геля
Forum robot, 08.11.2006 11:42
Mks, 08.11.2006 11:47
Уважаемые коллеги! Поделитесь опытом очистки олигонуклеотидов на полиакриламидном геле.Как проводится методика(более детально).Буду признателен и если смогу чем нибудь помочь Вам-всегда рад!
Green4enko@bigmir.net
Green4enko@bigmir.net
Mks, 30.11.2006 18:13
У меня есть вопросы по пункту 6-8.
п.6 как отделить раствор от кусочков геля, если получается сплошная гелевая масса и настолько густая, что приходиться добавлять водный раствор лития перхлората больше 350 мкл, чтобы хоть что-нибудь отфильтровать. После фильтрации геля, часть его остается выше фильтра, а часть проходит сквозь фильтр, или же гелевая масса пролетает насквозь полностью.
п.7-8 при добавлении ацетона фильтрат соответственно становится твердым веществом. Как поступать дальше - осадок содержит кусок геля. В п.9 требуется промывать осадок холодным ацетоном, но это не приведет к очистке олигов от остатков геля.
Видимо, наша проблема заключается в фильтрации. Пробовали через наконечник пипетки с фильтром (предварительно измельчив и позамачивав).
К гелевой массе добавляем жидкости достаточно: на 2 г геля 350+ мкл.
Подскажите что мы делаем неправильно. Набили кучу шишек, а решения все невидно.
п.6 как отделить раствор от кусочков геля, если получается сплошная гелевая масса и настолько густая, что приходиться добавлять водный раствор лития перхлората больше 350 мкл, чтобы хоть что-нибудь отфильтровать. После фильтрации геля, часть его остается выше фильтра, а часть проходит сквозь фильтр, или же гелевая масса пролетает насквозь полностью.
п.7-8 при добавлении ацетона фильтрат соответственно становится твердым веществом. Как поступать дальше - осадок содержит кусок геля. В п.9 требуется промывать осадок холодным ацетоном, но это не приведет к очистке олигов от остатков геля.
Видимо, наша проблема заключается в фильтрации. Пробовали через наконечник пипетки с фильтром (предварительно измельчив и позамачивав).
К гелевой массе добавляем жидкости достаточно: на 2 г геля 350+ мкл.
Подскажите что мы делаем неправильно. Набили кучу шишек, а решения все невидно.
watchesonline89, 20.12.2022 15:59
watchesonline89, 20.12.2022 16:01
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.