Полная версия страницы  English  

Методы

Pages: 1, 2, 3, 4, 5, 6
guest: ммм , 05.08.2010 19:47
--Да, присутствуют: использую апротинин, леупептин, ортованадат и PMSF. Несколько лет назад эта методика работала в этой же научной группе, а теперь в моих руках - не получается

Гуга! Здесь ингибитор фосфатаз ванадат, разве что.

Мой вам совет добавить в форез и во все буфера: сэмпл, для переноса, инкубации и тд. ЭДТА до 1мМ. Очень помогает от фосфатаз дешево и сердито.

-а я использовала молоко в случае вторичного антитела. Неужели это имеет значение?!

А вы сами то подумайте основной белок молока это что? - КАЗЕИН. А казеин один из самых фосфорилированных белков. Желатин еще можно вместо BSA.
Tom1, 05.08.2010 19:48
(Liudmila @ 05.08.2010 09:16)
Ссылка на исходное сообщение  Том1, спасибо за внимание!
1.Оцениваю увеличение фосфорилирования качественно, на глазок.
2.Использую антитела к фосфопептидам.
3. Да, присутствуют: использую апротинин, леупептин, ортованадат и ПМСФ. Несколько лет назад эта методика работала в этой же научной группе, а теперь в моих руках - не получается.
Обнаружила в интернете, что в случае антител против фосфопептидов надо использовать БСА вместо молока на всех этапах обработки блота, а я использовала молоко в случае вторичного антитела. Неужели это имеет значение?!

1. я бы насыпал кроме вандата исчо и флорит натрия и ортофосфат натрия.
2. НИКАКОГО МОЛОКА!!!!!! ТОЛьКО БСА!!!!! в молоке полным полно фосфобелков и большауя веротность что ваши антела туда и уходят.
3. что бы я обязательно сдлел бы поставил контроль на фосфорелирование ваших белков схема такая : ИП ваших белков делите на три части и одну не обрабатываите фосфотазой, вторая треть + фосфотаза и третья +фосфотаза+ ингибиторы и смотрите все вестерном.....
Liudmila, 05.08.2010 20:26
Спасибо, ммм, спасибо, Tom1!
Учту ваши советы!
guest: Ufa1688 , 01.09.2022 17:18
In the buildup ทางเข้าufa1688 to the current Ukrainian aff 1688 counteroffensive, the United States ufabet เข้า สู่ระบบ urged Kyiv to keep ดรีมเกมส์ the operation limited D88 Green Dragon in both its objectives and its Big gaming geography to avoid getting overextended สล็อต ufa1688 and bogged down Manna Play on multiple fronts, multiple Funky Games US and western officials and Ukrainian kingmaker sources tell CNN.
Shikooo, 18.09.2022 23:09
جول العرب
https://goal-arab.com
Shikooo, 21.10.2022 03:03
https://clients1.google.co.jp/url?q=http%3A...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.mt/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.ng/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.pr/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.sv/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.hn/url?q=http%3A%2F...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.ik/url?q=http%3A%2F...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.co.ke/url?q=http%3A...rncoupon.com%2F
https://images.google.co.ke/url?sa=t&url=ht...rncoupon.com%2F
https://images.google.com/url?sa=t&url=http...Fearncoupon.com
https://images.google.co.ug/url?sa=t&url=ht...rncoupon.com%2F
https://images.google.co.ve/url?sa=t&url=ht...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.ag/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.bz/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.cy/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.gh/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.kh/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.ni/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.om/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.lu/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.rw/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.sn/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.to/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.tt/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.eg/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.pe/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://clients1.google.com.lv/url?q=http%3...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.co/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.my/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.com.pk/url?sa=t&url=h...rncoupon.com%2F
https://images.google.sc/url?sa=t&url=https...rncoupon.com%2F
https://maps.google.cd/url?q=http%3A%2F%2Fw...rncoupon.com%2F
https://maps.google.cm/url?q=http%3A%2F%2Fw...rncoupon.com%2F
https://maps.google.dj/url?q=http%3A%2F%2Fw...rncoupon.com%2F
https://maps.google.dz/url?q=http%3A%2F%2Fw...rncoupon.com%2F
https://www.google.com/url?sa=t&url=https%3...earncoupon.com/
https://www.google.com/url?sa=t&url=https%3...Fearncoupon.com
https://t.me/iv?url=https%3A%2F%2Fearncoupon.com/
https://www.youtube.com/redirect?q=http%3A%...oupon.com&gl=GB
http://maps.google.com/url?sa=t&url=http%3...Fearncoupon.com
http://maps.google.com/url?q=https%3A%2F%2Fearncoupon.com%2F
http://plus.google.com/url?q=https%3A%2F%2Fearncoupon.com
http://plus.google.com/url?q=http%3A%2F%2Fearncoupon.com%2F
http://m.ok.ru/dk?st.cmd=outLinkWarning&st...Fearncoupon.com
http://toolbarqueries.google.co.jp/url?q=h...Fearncoupon.com
http://www.google.co.uk/url?q=http%3A%2F%2Fearncoupon.com%2F
http://cr.naver.com/redirect-notification?...Fearncoupon.com
http://blogs.rtve.es/libs/getfirma_footer_...Fearncoupon.com
http://auto.idnes.cz/redir.aspx?url=https%...Fearncoupon.com
http://images.google.ru/url?sa=t&url=https...Fearncoupon.com
http://blogs.rtve.es/libs/getfirma_footer_...Fearncoupon.com
http://pb.lib.berkeley.edu/xtf/servlet/org...Fearncoupon.com
http://blog.idnes.cz/redir.aspx?url=https%...Fearncoupon.com
http://images.google.cz/url?q=http%3A%2F%2Fearncoupon.com
http://toolbarqueries.google.cz/url?q=http...Fearncoupon.com
http://yambase-test.sgn.cornell.edu/forum/...Fearncoupon.com
http://ipv4.google.com/url?q=https%3A%2F%2Fearncoupon.com
http://cse.google.cz/url?sa=i&url=http%3A%...rncoupon.com%2F
http://wiki.idnes.cz/bohuslav-svoboda-0ea-...Fearncoupon.com
http://xman.idnes.cz/matematik-alexander-g...Fearncoupon.com
http://ona.idnes.cz/potraty-ve-svete-0ec-/...Fearncoupon.com
https://sc.sie.gov.hk/TuniS/earncoupon.com/
guest: 123vega , 12.11.2022 12:04
A long, beautiful stretch SUPERSLOT เครดิตฟรี of sand in Australia's สล็อต โร มา เว็บตรง tropical far north, Wangetti Beach, was Toyah ทดลองเล่นสล็อตโรม่า Cordingley's favourite beach. It is also where she died, in what ROMA SLOT has been called a "frenzied and brutal and sadistic" attack. SLOT JOKER The 24-year-old had gone to the SLOTXO beach to walk her dog on 21 October 2018, as she เครดิต ฟรี กด รับ เอง 50 บาท had done countless times before, but never came home. The PG SLOT ซื้อฟรีสปิน next morning her father found her "messed up" body half buried in sand dunes. Her JOKER ROMA เว็บตรง beloved dog was tied up nearby, unharmed. Four PG SLOT ทางเข้า years on, Australian authorities are appealing for the public's help in an international hunt to find the man they believe killed Toyah - Rajwinder Singh.
ZMskyuza, 11.10.2023 00:18
1
ZMskyuza, 11.10.2023 00:18
1
ZMskyuza, 11.10.2023 00:18
1
ZMskyuza, 11.10.2023 00:18
1
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.