Полная версия страницы  English  

Очистка и концентрирование вирусов

robox22, 21.06.2020 14:48
Всем привет. Интересует современная литература на русском и английском языках по сабжу. Заранее благодарю.
CowDoc, 21.06.2020 15:08
вас лаб.объемы, препаративные, интересуют, или промышленные?
По лаб. методам в любом сборнике протоколов, ничего не поменялось с 80х. Или ультрацентрифуга+градиент, хромотография, ПАВы/флоукулянты.
По промышленному, зависит от объемов, и бюджета, а так же конечного продукта, целевой аудитории человек/животное. В этой связи DSP выстраивается, вернее, подстраивается под очистку. Все завязано на комбинации clarification+UF/DF+precipitation+UF/DF+0,22um. Для человека вставляется проточное градиентное ультрацентрифугирование. Но что последние годы выходило по биопроцессингу, все в общих словах описывается, в основном их каталогов/буклетов фирм поставляющих оборудование/расходники.
Т.к. меня больше промышленные методы то могу посоветовать:
- Biomanufacturing_[Chander_Prakash_Sunpreet_Singh]_2019.
- Biopharmaceutical_Processing_[Gunter_Jagschies,_Eva_Lindskog]_2018
- Bioprocessing technology for production of biopharmaceuticals bioproducts[Komives_Claire;_Zhou_Weichang]_2019
- Filtration and Purification in the Biopharmaceutical Industry[Jornitz,_Maik_W.]_2019
- - Process Development Strategies for Manufacturing Biopharmaceuticals_[F_Jameel,_S_Hershenson]_2010
robox22, 21.06.2020 15:19
Лабораторные объемы 100к доз вакцины для животных в месяц. Вирус чистим растворитель,хроматография, 0.22um, инактивация, адъювант и готово. Ультрацентрифуги к сожалению нет.
Vadim Sharov, 21.06.2020 15:22
Вирусы

http://www.biohab.ru/index.php?/topic/5222...83%D1%81%D1%8B/
CowDoc, 21.06.2020 16:02
(robox22 @ 21.06.2020 15:19)
Ссылка на исходное сообщение  Лабораторные объемы 100к доз вакцины для животных в месяц. Вирус чистим растворитель,хроматография, 0.22um, инактивация, адъювант и готово.

Зачем вам хроматография для животных??? У вас, что, лошади? DIVA-тестами увлекаетесь? Себестоимость вакцины дикая будет.
3% NaCl и 7% PEG-6000 --> +4оС 18 часов и центрифуга.
Или TFF мембраны или волокна на 1000kD потери меньши чем с ПЭГом.
А самый простой, адсорбцией на люминий (адъювант сразу чуть квила и хитозанчика), только инактивацию заранее.
Напишите в личку, дам протокол под вирусок, если делаем или делал.
robox22, 21.06.2020 16:28
На дэае целлюлозе
robox22, 21.06.2020 16:29
Адсорбцию на аэросил делаем
CowDoc, 21.06.2020 17:00
Из Нарвака?
robox22, 21.06.2020 18:28
Нет
robox22, 21.06.2020 20:09
А если peg'ом концентрировать вирус, Peg потом нужно удалять из вирусной суспензии?
CowDoc, 22.06.2020 09:59
(robox22 @ 21.06.2020 20:09)
Ссылка на исходное сообщение  А если peg'ом концентрировать вирус, Peg потом нужно удалять из вирусной суспензии?

Если эмульсионную делаете вакцину, особенно на множественной эмульсии, на говняных адъювантах СЕППИК, то да. ПЭГ = ПАВ, но не той мол.массы и работает как детергент в эмульсионной системе на моноолеатах.
Поэтому в производстве, серьезном, комбинируют UF/DF с ПЭГом.

В ваших объемах, 100k доз, целевой организм вы не сказали какой, как и объект/объекты (может у вас поливалентная) концентрирования, посему предположу, что это 100-200 литров вакцины. Что вы концентрируете в 100 раз, не поверю. Тем более на целлюлозе (бред не технологичный и очень дорогой, с огромными потерями). Посему раз в 5-10 (если на аэросиле), т.е. первоначальный объем литров 500 до тонны. В конечном объеме 5% аэросила, сапонин must have + ко-адъюванты, или аэросиловый осадок мешаете с маслом. Не тихорите, расскажите. Или, делайте, как делаете. Не заморачивайтесь.
Если у вас не эмульсионный препарат, то от ПЭГ желательно освобождаться. Что тж не проблема.
Сорбированный, можно игнорировать, если предварительная очистка от баластного белка прошла нормально.
Это — лёгкая версия форума. Чтобы попасть на полную, щелкните здесь.
Invision Power Board © 2001-2024 Invision Power Services, Inc.