Метод позволяет выделять фрагменты DNA любой длины.
Выделение ДНК из агарозного геля
вырезать полосу из геля под длинноволновым UV (360 nm);
поместить в диализный мешок, расположить его перпендикулярно электрическому полю;
"выгнать" DNA из геля на стенку мешка, переключить ток на 15'' в обратную сторону;
извлечь из диализного мешка буфер;
довести NaCl до 0.1M;
экстрагировать Ф, Ф:Х, Х;
добавить
1/4V 10M AcONH4,
2V EtOH, осадить;
сполоснуть 70% EtOH;
растворить в воде или TE.
Приготовление диализных трубок
для большинства задач можно использовать мембрану прямо из рулона после смачивания и ополаскивания водой. При необходимости, глицерол-, серо-содержащие компоненты и тяжелые металлы могут быть убраны следующим образом:
отрезать трубку необходимой длинны;
смочить и кипятить 2-5' (либо вымачивать без кипячения по 30') в большом избытке10mМ бикарбоната натрия;
2х кипятить 2-5' (либо вымачивать без кипячения по 30') в большом избытке 10mМ EDTA;
MolBiol.ru >
Методы >
ДНК из геля > С помощью диализного мешка
Zbio-wiki
Дополнить