Выделение RNA из мух (Протеиназа К)


MolBiol.ru > Методы > RNA > Выделение RNA из мух (Протеиназа К)

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · ·

Zbio-wiki

Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ИСТОРИЯ ЗООМУЗЕЯ

Выделение RNA из мух (с Протеиназой К)

Метод для выделения РНК прочно связанной с белками.
Подготовила Оксана Кравчук, Институт Биологии гена.

гомогенизировать 100 мух в 2ml DB;
инкубировать 37^oС, 20';
очистка фенол-хлороформ, хлороформ;
добавить

50µl 8 М LiCl,
3V EtOH; осадить;

растворить осадок в 200µl H₂O и осадить равным объемом 4M LiCl при 4^oС в течение ночи;
растворить осадок в 200µl H₂O и добавить 3 объема этанола (так хранить);
если нужно осадить, то добавить 20µl 3М AcNa, pH 5.1

MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 12917

Комментарии

Общие

Преимущество метода в том, что на начальных стадиях выделения не используется фенол, и поэтому не теряется РНК, прочно связанная с белком.
Протокол взят из статьи: Danilevskaya ON, Traverse KL, Hogan NC, DeBaryshe PG, Pardue ML. The two Drosophila telomeric transposable elements have very different patterns of transcription. Mol Cell Biol. 1999 19(1):873-81.

По пунктам

п. 3.

Также, как для ДНК. Можно использовать как нейтральный, так и кислый фенол.

Дополнения, комментарии, вопросы

Люди знающие! Здесь недостаёт того, что знаете вы, но не знал или забыл автор. Этой страницей пользуются ваши коллеги. Пожалуйста, поделитесь с ними опытом. Пригодится всё, что поможет в работе.

Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/

-- как прислать био-картинку --

Дата последней модификации: 30/07/13

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ИСТОРИЯ ЗООМУЗЕЯ

· Викимарт - все интернет-магазины в одном месте · Доска объявлений Board.com.ua ·

--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---

--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru · redactor@molbiol.ru · реклама